Diversidad genotípica y fenotípica en Enterococcus faecalis: ¿Es la invasión en agar un marcador de patogenicidad?

espanolObjetivos. El principal objetivo de este trabajo es la caracterizacion de determinantes de virulencia genotipicos y fenoti- picos relacionados con patogenicidad en Enterococcus faecalis, evaluando ademas el fenotipo de invasion en agar en una coleccion de aislados clinicos de diversa procedencia. Material y metodos. Se han analizado 79 cepas de E. faecalis aisladas en infecciones invasivas y no invasivas. La deteccion de los principales determinantes asociados a la virulencia (cylA, gelE, esp, asa1, efaA y ace) se ha realizado mediante PCR. La caracterizacion fenotipica incluyo la deteccion de actividad gelatinasa, hemolisis, formacion de biofilm y el test de invasion en agar. Resultados. Todos los aislados presentaron, al menos, un determinante de virulencia. El 95,5% de las cepas provenientes de hemocultivos resultaron positivas para el test de invasion en agar, significativamente superior a lo observado en cepas de origen clinico no invasivo. En tres cepas seleccionadas, positivas para el test de invasion en agar, se observo una reduccion significativa del area relativa de invasion tras 15 pases seriados. Conclusiones. Se ha observado una alta prevalencia de cepas con alto grado de invasion en agar en los aislados hematologicos. Dicho grado de invasion disminuye significativamente al adaptar tres cepas al crecimiento en condiciones de laboratorio, sugiriendo una modulacion en funcion de las condiciones de cultivo tal y como ocurre con otros determinantes asociados a virulencia en diferentes especies bacterianas. EnglishObjectives. The main objective of the present study is to analyze different genotypic and phenotypic traits related to virulence in Enterococcus faecalis, as well as evaluated the agar invasion phenotype in a collection of isolates with different clinical origins. Material and methods. Seventy-nine E. faecalis isolates, with invasive and non-invasive clinical origins, have been used in this work. Presence of cytolysin activator (cylA), gelatinase (gelE), surface protein (esp), aggregation substance (asa1), endocarditis antigen (efaA), and collagen-binding protein (ace) have been analyzed by PCR. Phenotypic characterization included gelatinase activity, haemolysin production, biofilm formation and agar invasion. Results. All the isolates tested harboured at least one of the virulence determinants. The 95.5% of isolates from haematologic samples were positive for agar invasion test, significantly higher than isolates from non-invasive diseases. A significant reduction in relative invasion area was observed in three selected agar-invasive strains after 15 serial passages. Conclusions. It has been observed a significant high prevalence of agar-invasion positive isolates among strains belonged to haematological samples. Agar invasiveness is reduced after adaptation of clinical isolates to laboratory conditions, showing that agar invasion phenotype can be modulate by culture conditions as other virulence factors observed in different bacterial species.