Efectos de extractos de Neopetrosia rosariensis sobre mieloperoxidasa y elastasa con la utilización del modelo neutrófilos

Introduccion: los neutrofilos son la primera linea de defensa, los cuales liberan su contenido granular, constituido entre otros por enzimas generadoras de especies reactivas del oxigeno como mieloperoxidasa y enzimas proteoliticas como la elastasa, que degradan elastina y colageno. Objetivo: evaluar la toxicidad de los extractos de la esponja marina Neopetrosia rosariensis y su accion como inhibidores de la desgranulacion del neutrofilo, e inhibicion de la actividad catalitica de la elastasa de neutrofilos humanos. Metodos: se determino la toxicidad por el metodo de exclusion del colorante azul de tripano. Se evaluo la desgranulacion por la disminucion del porcentaje de liberacion de la mieloperoxidasa, y se determino la inhibicion de la actividad catalitica de la elastasa de neutrofilos humanos por la reduccion de la actividad de la enzima de un sustrato especifico. Resultados: los extractos presentaron baja toxicidad a las concentraciones evaluadas, con porcentaje de viabilidad celular superior al 80 %, incluso a la concentracion mas alta utilizada (25 µg/mL). Tambien presentaron actividad inhibitoria de la liberacion de mieloperoxidasa, concentrandose el efecto en los extractos mas polares (metanolico total y parcial) y la inhibicion de la actividad de la elastasa en los de mas baja polaridad (hexano y diclorometano parcial), a concentraciones de 10 y 25 µg/mL, acorde con la naturaleza lipofilica del sitio activo de la enzima. Conclusiones: los resultados en los extractos evaluados son promisorios, teniendo en cuenta que cada muestra representa una mezcla compleja de compuestos activos entre 10 y 25 µg/mL, lo que resulta de mucho interes para continuar con su fraccionamiento como agentes potenciales para la posible terapia de enfermedades que presentan procesos inflamatorios. Introduction: neutrophils are the first line of defense, releasing their granular contents made up of reactive oxygen species-generating enzymes such as myeloperoxidase and proteolytic enzymes such as elastase, which degrade elastin and collagen. Objective: to evaluate toxicity of marine sponge Neopetrosia rosariensis extracts and their action as inhibitors of neutrophil degranulation and inhibition of the catalytic activity of human neutrophil elastase. Method: the cytotoxicity was assessed by Trypan blue exclusion test of cell viability. Degranulation inhibition was evaluated by reduction of myeloperoxidase release percentage and inhibition of catalytic activity of elastase was determined by reduction of enzyme activity on specific substrate. Results: the extracts exhibited low toxicity at the evaluated concentrations, with cellular viability percentage exceeding 80 % even at the highest concentration (25 µg/mL). They also showed inhibitory action of myeloperoxidase release, the greatest effect being concentrated on the most polar extracts (total and partial methanolic). The inhibition of the elastase activity was mostly found in the lowest polarity extracts (hexane and partial dichloromethane) at concentrations of 10 and 25 µg/mL, according to the hydrophobic character of the active site of the enzyme. Conclusions: these results of the evaluated extracts are encouraging, considering each extract represents a complex mixture of active compounds of 10-25 µg/mL. This arouses great interest to continue their fractioning as potential agents for possible therapy of inflammatory processes.