Astemizole, an Inhibitor of Ether--Go-Go-1 Potassium Channel, Increases the Activity of the Tyrosine Kinase Inhibitor Gefitinib in Breast Cancer Cells

espanolAntecedentes: la expresion y la actividad del canal de potasio eter-a-go-go-1 (EAG1) estan fuertemente relacionadas con la carcinogenesis y la progresion tumoral, que pueden explotarse con fines terapeuticos. La actividad de EAG1 puede reducirse evitando su fosforilacion con inhibidores de la quinasa del receptor del factor de crecimiento epidermico (EGFR) y con astemizol, que bloquea el poro del canal y regula negativamente su expresion genica. Objetivo: Nuestro objetivo fue estudiar el posible efecto antiproliferativo cooperativo del inhibidor de EGFR gefitinib y el astemizol bloqueador de EAG1, en celulas de cancer de mama. Materiales y metodos: las celulas se caracterizaron por inmunocitoquimica. Las concentraciones inhibitorias se determinaron mediante analisis de regresion no lineal utilizando curvas de dosis-respuesta. La naturaleza del efecto farmacologico se evaluo mediante la ecuacion de indice de combinacion, mientras que el analisis del ciclo celular se estudio mediante citometria de flujo. Resultados: el astemizol y el gefitinib inhibieron la proliferacion celular de manera dependiente de la concentracion, con valores de concentracion inhibitoria (CI50) de 1.72 µM y 0.51 µM, respectivamente. Todas las combinaciones dieron como resultado un efecto antiproliferativo sinergico. La combinacion de astemizol y gefitinib disminuyo el porcentaje de celulas en las fases G2 / M y S, mientras que aumento la acumulacion en G0 / G1 del ciclo celular. Conclusiones: el astemizol y el gefitinib inhibieron sinergicamente la proliferacion en las celulas de cancer de mama que expresan tanto EGFR como EAG1. Nuestros resultados sugieren que el tratamiento combinado aumento la muerte celular al enfocarse en la actividad oncogenica de EAG1. EnglishBackground: Expression and activity of the potassium channel ether-a-go-go-1 (EAG1) are strongly related to carcinogenesis and tumor progression, which can be exploited for therapeutic purposes. EAG1 activity may be reduced by preventing its phosphorylation with epidermal growth factor receptor (EGFR) kinase inhibitors and by astemizole, which blocks the channel pore and downregulates its gene expression. Objective: We aimed to study the potential cooperative antiproliferative effect of the EGFR inhibitor gefitinib and the EAG1-blocker astemizole, in breast cancer cells. Materials and Methods: The cells were characterized by immunocytochemistry. Inhibitory concentrations were determined by non-linear regression analysis using doseresponse curves. The nature of the pharmacological effect was evaluated by the combination index equation while cell cycle analysis was studied by flow cytometry. Results: Astemizole and gefitinib inhibited cell proliferation in a concentration-dependent manner, with inhibitory concentrations (IC 50) values of 1.72 µM and 0.51 µM, respectively. All combinations resulted in a synergistic antiproliferative effect. The combination of astemizole and gefitinib diminished the percentage of cells in G2/M and S phases, while increased accumulation in G0/G1 of the cell cycle. Conclusions: Astemizole and gefitinib synergistically inhibited proliferation in breast cancer cells expressing both EGFR and EAG1. Our results suggest that the combined treatment increased cell death by targeting the oncogenic activity of EAG1. (REV INVEST CLIN. 2019;71:186-94)