Caractéristiques des IgA promptes à se déposer dans le mésangium

Introduction Le depot mesangial d’immunoglobuline (Ig) A est l’element caracteristique de la nephropathie a depots d’IgA et du purpura rhumatoide. Plusieurs anomalies des IgA1, comme la modification de la glycosylation de leur region charniere, ont ete suggerees pour expliquer la localisation tres specifique de ces depots. Ces anomalies sont cependant inconstantes. Il est donc necessaire de preciser les caracteristiques des IgAs qui ont la propriete de se deposer ; pour ce faire nous avons analyse plusieurs IgA monoclonales. Materiels et methodes Dix IgA monoclonales (mAbs) de specificites differentes dirigees contre des antigenes non murins ont ete purifiees a partir d’hybridomes de souris produisant de l’IgA1 humaine. Ces mAbs ont ete injectes par voie intraveineuse a des souris immunodeficientes Swiss Nu/Nu et les reins ont ete recuperes 2 h apres. Les cellules de ces hybridomes ont ete injectees en intraperitoneal a des souris RAG-2/γc euthanasiees au bout de six semaines. La presence d’IgAs mesangiales a ete revelee par immunofluorescence sur coupe. Les caracteristiques physico-chimiques des 10 mAbs ont ete examinees : quantification de la glycosylation par test lectine, analyse des formes mono- et polymeriques sur gel d’electrophorese, calcul du point isoelectrique des regions determinant la complementarite (CDR) apres sequencage des regions VH et Vk, evaluation de la stabilite par mesure du dichroisme circulaire, et resistance a la digestion par la trypsine. Resultats Un depot intense a ete observe pour le mAb #6 et de faible intensite pour les mAbs #1 et #5 mais aucun depot pour les 7 autres mAbs. Seule la greffe de l’hybridome #6 permet d’objectiver un depot intense et prolonge. Rien dans le degre de glycosylation, de polymerisation, le point isoelectrique et la resistance a la digestion trypsique ne permet de distinguer le mAb #6 des mAbs qui ne se deposent pas. Le mAbs le plus stable est #6. Pour faire la part de ce qui depend de l’IgA complete ou de sa seule partie variable, une IgG1 humaine possedant la meme partie variable que l’IgA #6 a ete produite et injectee dans les memes conditions ; cette IgG1 #6 se depose tres peu en comparaison de l’IgA #6. Discussion et conclusion Cette etude montre que le depot est independant de la glycosylation des IgA1 mais suggere que c’est l’association d’une chaine lourde α et d’une chaine variable specifique qui autorise le depot dans le mesangium.