Test visuel rapide de génotypage érythrocytaire

L’hemagglutination est la technique de reference pour la determination d’un phenotype erythrocytaire. Neanmoins, cette technique serologique presente des limites, et plus particulierement dans certaines situations ou le phenotypage erythrocytaire des patients ne peut etre realise. Dans ce contexte, la determination d’un genotype par biologie moleculaire permet d’obtenir un phenotype deduit pour le patient et ainsi de prevenir les risques d’allo-immunisation anti-erythrocytaire ou de limiter le risque d’incident transfusionnel. Pour repondre a cette problematique, nous avons developpe un test moleculaire rapide et innovant permettant de deduire visuellement le phenotype etendu dans le cadre de la prise en charge transfusionnelle du patient. Cette technologie repose sur la co-amplification par PCR multiplexe de plusieurs fragments d’ADN genomique directement a partir de sang total, et sur l’utilisation d’un support type membrane Lateral-Flow pour la lecture visuelle des resultats. Les amplicons biotinyles et les reactifs de revelation migrent par capillarite dans la membrane. L’apparition de spots colores, resultant de l’hybridation des amplicons biotinyles complexes avec les nanoparticules d’or et des sondes greffees sur la membrane, indique la presence des alleles correspondants. L’absence de coloration traduit l’absence des alleles concernes. Nous presentons les resultats de l’evaluation de cette technologie sur un panel d’echantillons de donneurs. Les resultats obtenus montrent que notre technologie brevetee, permet de deduire un phenotype erythrocytaire en une heure, pour six antigenes d’interet (JK1/JK2, FY1/FY2/FY2null et MNS3/MNS4).