085 Régulation par les PAMP des protéines de jonctions intercellulaires dans les interactions entre cellules épithéliales bronchiques et cellules dendritiques

Introduction L’exposition des voies aeriennes a des motifs conserves de bacteries (PAMP) regule la reponse immune locale notamment par son action sur les cellules epitheliales bronchiques (CEB) et sur les cellules du systeme immunitaire dont les cellules dendritiques (DC). L’activation des CEB par les PAMP conduit au recrutement des DC alors que le developpement de la reponse immune est limite par les jonctions intercellulaires entre les CEB. De plus les DC ont la capacite d’exprimer certaines proteines de jonctions intercellulaires (PJI). Notre objectif est de definir la nature et les mecanismes des interactions entre DC et CEB en se focalisant sur l’implication de ces PJI. Methodes L’expression des PJI est analysee par cytometrie en flux et par immuno-empreinte dans les DC stimulees par le Pam3Cys-SK4, le pIC et le LPS pour les TLR2, 3, 4 respectivement. L’etude des interactions CEB/DC et la localisation des PJI sur les DC sont analysees par microscopie confocale. Enfin, le role de la voie NF-κB a ete evalue avec l’inhibiteur BAY 11-7082. Resultats Les ligands de TLR2 et 4 induisent la maturation des DC (augmentation de HLA-DR, CD86 et CD83) et entrainent une augmentation de l’expression de la E-Cadherine et de ZO-1 a 4 heures, de la β-Catenine a 8h et de l’Occludine a 24 heures dans les DC. Le TLR3 a un effet moindre a ce niveau. De plus, l’inhibition de NF-κB annule ces modulations. Par ailleurs, la P-Catenine semble membranaire suite a l’activation des TLR dans les DC cultivees seules, alors que la E-Cadherine reste cytoplasmique. La repartition des PJI sur les DC en coculture est en cours d’analyse. Conclusion L’activation par le TLR2 ou 4 regule l’expression des PJI sur les DC permettant l’interaction avec les CEB. Ce mecanisme fait intervenir NF-κB . Ce modele permettra d’evaluer les consequences fonctionnelles de la formation des jonctions sur les fonctions des DC. L’intervention de ce mecanisme au cours de la sensibilisation aux allergenes et dans le developpement de la reaction allergique sera ensuite analysee.