Génotypage RHD foetal non invasif sur sang maternel : optimisation du processus analytique au laboratoire IHE de l’EFS Auvergne-Rhône-Alpes

Le genotypage RHD fœtal sur sang maternel est une technique fiable et non invasive qui permet d’adapter la prevention de l’allo-immunisation anti-RH1 chez les femmes enceintes RH :-1 non immunisees, et d’optimiser la prise en charge obstetricale des femmes enceintes RH :-1 allo-immunisees. Cette methode a ete validee en l’adaptant aux contraintes logistiques et techniques rencontrees : extension du delai de traitement des echantillons a 5 jours apres prelevement, utilisation de tubes secs avec gel separateur. La faible quantite d’ADN fœtal present, ainsi que la presence d’ADN maternel en quantite superieure a l’ADN fœtal, sont des limites de la methode, impliquant lors de l’etape de validation des resultats la prise en compte de plusieurs criteres (âge gestationnel, profil des courbes, homogeneite de l’amplification). Comme pour toute technique de biologie moleculaire, des procedures sont mises en place et doivent etre strictement respectees pour eviter les contaminations inter-echantillons ; de meme, des temoins positif et negatif, un « blanc echantillon » et un gene controle sont inclus dans chaque serie, et leurs Resultats verifies avant validation des resultats des echantillons testes. Plusieurs etapes manuelles se succedent au cours de l’etape analytique, chronophages et exposant a un risque de croisement des tubes : une methode de travail rigoureuse comprenant plusieurs auto-controles sont systematiquement realises. Le laboratoire IHE de l’EFS AURA s’apprete a optimiser l’automatisation de toutes les etapes d’extraction et d’amplification de l’ADN permettant un gain de temps et de securite du processus.