Variability in the recognition of distinctive immunofluorescence patterns in different brands of HEp-2 cell slides

2013 
INTRODUCAO: A imunofluorescencia indireta (IFI) utilizando celulas HEp-2 como substrato antigenico e o teste padrao-ouro para a pesquisa de autoanticorpos contra antigenos celulares. Contudo, as condicoes de cultivo, fixacao e permeabilizacao celular interferem diretamente na preservacao e na distribuicao espacial dos antigenos. Portanto, pode-se presumir que distintas condicoes no preparo das celulas possam interferir no reconhecimento dos padroes de imunofluorescencia associados aos diversos autoanticorpos. OBJETIVO: Avaliar um painel de amostras de soro representativo de padroes nuclear, nucleolar, citoplasmatico, de aparelho mitotico e de placa cromossomica em substratos de celulas HEp-2 de diferentes fornecedores. MATERIAIS E METODOS: Sete observadores blindados e independentes de tres centros de referencia avaliaram 17 amostras que apresentavam diferentes padroes nucleares, nucleolares, citoplasmaticos e associados ao aparelho mitotico em lâminas com celulas HEp-2 de oito procedencias. As lâminas foram codificadas para manter a confidencialidade das marcas, bem como dos centros participantes. RESULTADOS: Os 17 padroes de imunofluorescencia em celulas HEp-2 foram reconhecidos na maioria dos substratos. No entanto, alguns substratos mostraram deficit na apresentacao de alguns padroes (nuclear pontilhado grosso/U1-ribonucleoprotein associado a anticorpos contra o RNP (U1 ribonucleoproteina), sugestivo da presenca de anticorpos anti-CENP-F (proteina centromerica F), sugestivo de anticorpos contra antigenos de celula em proliferacao (proliferating cell nuclear antigen [PCNA]), citoplasmatico pontilhado fino associado a anticorpos anti-Jo-1 (histidil sintetase), anti-NuMA-1 (nuclear mitotic apparatus protein 1) e anti-NuMA-2 (nuclear mitotic apparatus protein 2). CONCLUSAO: Em que pese a boa qualidade geral dos substratos avaliados, existe divergencia nos resultados obtidos entre os diferentes substratos comerciais. As variacoes observadas podem ser devidas aos lotes avaliados, portanto nao se pode generalizar para as respectivas marcas. Recomenda-se que cada novo lote ou marca de lâmina sejam testados com diferentes soros referencia representativos dos diversos padroes.
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