Myogenic precursor cell impairment in dermatomyositis and other myositis

Les myopathies inflammatoires idiopathiques (MII) constituent un groupe heterogene de maladies musculaires acquises. Parmi elles, la dermatomyosite (DM) est la plus frequente, survenant a tous les âges de la vie, et pouvant engager le pronostic vital. Le diagnostic repose sur l'association d'une faiblesse musculaire, d'infiltrats inflammatoires sur la biopsie musculaire et d'auto-anticorps dans le serum. La pathogenese apparait multifactorielle, avec de nombreuses etudes concentrees sur l'immunite adaptative, et reste a ce jour incompletement comprise. Dans le muscle de DM, la regeneration ne compense pas la necrose, et ceci induit une evolution chronique. Neanmoins, la capacite de regeneration musculaire a ete tres peu etudiee dans ces pathologies. Dans le muscle normal, la regeneration du muscle lese se fait par un processus de myogenese initie par les cellules souches musculaires (CSM) et permet une reparation ad integrum du tissu lese. L’objectif de ce projet est d'evaluer la capacite des CSM derives de DM a realiser le processus de myogenese. Patients et methodes : Une selection de patients DM (severe [n = 5] et legere [n = 3]) et des controles sains (CT [n = 5]) (apparies sexe et âge) a ete effectuee dans la base de donnees des Hospices Civils de Lyon dont les echantillons etaient disponibles en biobanque. Une etude complementaire a ete realises sur d’autres patients IIM : myopathie necrosante auto-immune (MNAI) (n = 3), myosite a inclusions (IBM) (n = 3) et syndrome des anti-synthetases (SAS) (n = 3). La myogenese a ete exploree in vitro par la culture de CSM pour l'evaluation de leur proliferation, de leur differenciation en myocytes et la fusion des myocytes en myotubes. La proliferation a ete evaluee par incorporation d'un analogue de la thymidine dans l'ADN. La differenciation myogenique terminale a ete evaluee par l'expression cellulaire de la myogenine. La fusion cellulaire a ete quantifiee comme le nombre de noyaux incorpores dans les myotubes. L’etude de la senescence a ete faite par cytometrie en flux avec un substrat fluorescent de SA-βGalactosidase, marqueur specifique de la senescence. Enfin, l’impact de l'inhibition de la signalisation interferon sur la myogenese in vitro a ete evalue avec un inhibiteur des kinases JAK et un anticorps bloquant. Resultats : La proliferation des CSM de DM est significativement plus faible que celle des CSM de CT (p = 0,0020). La differenciation myogenique terminale est egalement tres alteree dans les CSM de DM severes, et a moindre niveau dans les cellules de DM legeres (p = 0,001). La fusion est significativement diminuee dans les DM avec une diminution majeure pour les DM severes et a un degre moindre pour les CSM de DM legeres (p <0,0001 pour chacun). Ces resultats ont ete reproduits pour les autres IIM, sauf les ASS. Grâce a des investigations cellulaires et moleculaires complementaires, nous avons trouve une senescence accrue dans les CSM de DM in vitro, et une implication potentielle de l'interferon de type I dans l'alteration de la myogenese. En effet, la myogenese des CSM de DM a ete amelioree voire restauree par l’adjonction des inhibiteurs de la signalisation interferon. Conclusions : Ces resultats montrent que la regeneration du muscle squelettique est alteree dans la DM en raison de la capacite alteree des CSM a realiser le processus de myogenese. Cela peut expliquer en partie les alterations musculaires et la faiblesse musculaire observees chez les patients Ces resultats soutiennent l'hypothese d'alterations intrinseques des proprietes des CSM dans la DM, potentiellement liees a la voie de l'interferon et participant a la pathogenese de la maladie