DESEMPENHO DE MEIOS FORMULADOS COM TRIGO, ARROZ, SOJA OU AVEIA PARA A PRODUÇÃO DE TOXINAS POR Bacillus thuringiensis var. israelensis EM FERMENTAÇÃO DESCONTÍNUA

“A bacteria Bacillus thuringiensis var. israelensis e utilizada na producao de bioinseticidas usados no controle de insetos de importância sanitaria, como Aedes aegypti e Anopheles gambiae, vetores da dengue e malaria, respectivamente. A atividade entomopatogenica, efetiva apenas contra o estagio larval do inseto, esta associada a cristais proteicos produzidos durante a esporulacao. Diversos subprodutos agroindustriais vem sendo testados como fonte de nutrientes para o processo visando reducao de custo. Neste trabalho, foram avaliados meios formulados com extrato de farelo de aveia e de trigo e de farinha de soja e de arroz, analisando-se o crescimento celular, a esporulacao e atividade toxica do meio fermentado. Para preparo dos extratos, o residuo solido foi misturado em agua (1:10 m/v) e mantido por 4 h a 100 min-1/30 oC e filtrado em tamis de malha fina. Apos autoclavacao (121 oC/20 min), o filtrado (90 mL) foi utilizado para compor o meio de cultivo (100 mL), o qual foi suplementado com nutrientes (sais minerais e extrato de levedura) do meio GYS. A fermentacao foi feita em frascos Erlenmeyer (500 mL), incubados em agitador-incubadora (30 °C/110 min-1), utilizandose 5% (v/v) de inoculo. O processo foi finalizado 2 h apos completa dissolucao dos grumos formados durante a esporulacao. O inoculo foi feito em meio GYS, com transferencia direta de aliquota da cultura estoque de esporos e incubacao por 12 h nas mesmas condicoes. Os resultados mostraram que tanto o crescimento quanto a esporulacao foram favorecidos nos meios formulados com extratos de trigo, arroz e soja, nos quais foi verificado um numero total de celulas (CT) da ordem de 1.109 ufc/mL, com taxas de esporulacao (TSP) media de 90%. Em meios formulados com extrato de aveia o valor de CT foi cerca de 75% menor (5,73.108 ufc/ mL), com taxa de esporulacao de apenas 65%. Com relacao a atividade larvicida, parâmetro de maior importância no processo, verificou-se elevada acao toxica, contra larvas de Ae. aegypti, dos meios formulados com soja e trigo. Meio a base de extrato de arroz teve desempenho significativamente inferior, apesar de crescimento e esporulacao similares. Meio com extrato de aveia, ao contrario, embora com crescimento e esporulacao inferiores, levou a atividade toxica proxima a obtida no meio composto com extrato de arroz. De maneira geral, os dados mostraram que os subprodutos testados, submetidos a um tratamento simples, podem ser empregados para este processo fermentativo.”