A vasháztartást szabályzó hepcidin kimutatása és szerepe a perinatalis vasháztartásban

A hepcidin egy nemregiben felfedezett, defenzin tipusu peptid, amely kozponti szerepet jatszik a vashaztartas szabalyozasaban. A hepcidin csokkenti a vastranszportban szerepet jatszo molekulak expressziojat, igy gatolja a vas gastrointestinalis rendszerből valo felszivodasat, makrofagokbol valo felszabadulasat, csokkentve ezzel a szerum vasszintjet. A hepcidin vashaztartasban betoltott szerepenek tisztazasa segithet a gyulladasos es kronikus betegsegekben bekovetkező anemia pontosabb megerteseben. Munkank kezdeten a hepcidin kimutatasara alkalmas, kereskedelmi forgalomban elerhető modszer nem allt rendelkezesre. Celunk volt egy, a vizelethepcidin kimutatasara alkalmas modszer kidolgozasa, valamint hogy ezen modszer segitsegevel vizsgaljuk a hepcidin jelentőseget a perinatalis vashaztartasban. Munkank soran a nativ, emberi hepcidin aminosav-szekvenciajanak megfelelően allitottunk elő peptidszarmazekokat, amelyek kozul az 1-7 peptidszarmazekrol igazoltuk, hogy alkalmas lehet a nativ hepcidin standard helyettesitesere immunreakcion alapulo modszerek fejlesztesekor. Kidolgoztunk egy, az emberi vizelethepcidin mennyisegi meghatarozasara alkalmas, lezerdeszorpcios tomegspektrometrias, szemikvantitativ modszert, amelyben az altalunk szintetizalt acetil-1-25 peptidszarmazekot mint hepcidinszerű belső standardot elsőkent alkalmaztuk. Kidolgoztunk a vizelet tisztitasara es a vizelethepcidin koncentralasara alkalmas, szilard fazisu extrakcion alapulo modszert. Az altalunk kidolgozott modszerrel elsőkent mertuk egeszseges ujszulottek vizelethepcidin-szintjet, valamint egy kereskedelmi forgalomban elerhető modszerrel a szerumprohepcidin-szintjet. Kimutattuk, hogy az erett ujszulottek korai adaptacioja soran a szerumprohepcidin-szint nem valtozik, a vizelethepcidin viszont szignifi kansan nő. A szerumprohepcidin- es a vizelethepcidin-szintek egymassal nem mutattak osszefuggest. Kimutattuk, hogy az erett ujszulottek vashaztartasanak korai adaptacioja soran a szerumprohepcidin-szintek kizarolag a vorosversejtek atlagos hemoglobinkoncentraciojaval, mig a vizelethepcidin-szintek a szerumvasszinttel es teljes vaskotő kapacitassal mutattak osszefuggest. Kimutattuk, hogy az erett ujszulottek vashaztartasanak korai adaptacioja soran a koldokzsinorver-mintakban az alacsonyabb szerumprohepcidin-szintek eseten szabad vas jelenlete igazolhato. Osszefoglalva: Eredmenyeink alapjan elmondhatjuk, hogy a hepcidinnek valoszinűleg szerepe van az ujszulottek korai, a vashaztartast erintő adaptaciojaban, azonban tovabbi vizsgalatok szuksegesek ahhoz, hogy ezt az osszefuggest biztosan megallapithassuk. Kulcsszavak: hepcidin, hepcidinszint, vas, perinatalis vashaztartas Role of iron metabolism-regulator hepcidin in perinatal iron homeostasis Hepcidin is a recently recognized defensin-like peptide, which is considered to be the central regulator of iron metabolism. Hepcidin decreases the expression of iron transporting molecules. Hepcidin reduces gastrointestinal iron absorption, iron release from the macrophages, and hence it decreases serum iron levels. Clarifi cation of hepcidin role in iron homeostasis could provide an explanation to anemia of infl ammation and chronic diseases. At start of our work there was no commercially available method for measuring urine hepcidin levels. The aim of our study was to develop an easily achievable, reliable quantifi cation method for the determination of urine hepcidin levels in human, in addition to examine a possible association of hepcidin with neonatal iron homeostasis. According to the sequence of native, human hepcidin we have synthesized peptide derivatives from which 1-7 peptide derivatives might be suitable representatives of the 25-amino-acid form of hepcidin in immune adsorption method. We presented a novel laserdesorption mass spectrometry based semi-quantitative, reproducible method for measuring hepcidin concentration in human urine fi rst using the synthesized peptide derivative acetyl-1-25 peptide as hepcidin related internal standard. We described an easy and quickly achievable solid-phase extraction method which is suitable for purifi cation of urine and concentration of hepcidin. In our study we have fi rst measured serum prohepcidin and urine hepcidin in healthy human newborns. Serum prohepcidin levels showed no signifi cant changes, however, urine hepcidin levels increased signifi cantly during the fi rst postnatal days. Serum prohepcidin and urine hepcidin levels showed no signifi cant association in healthy human newborns. Associations have been demonstrated between cord blood prohepcidin values and mean corpuscular hemoglobin concentration as well as between urine hepcidin levels and serum