Production d’un anticorps monoclonal humain anti-VEL, clone SpG213Dc

Une immunisation du type anti-Vel a ete decrite pour la premiere fois en 1952. La nature de l’antigene implique est restee inconnue jusqu’a des travaux recents qui ont decrit la proteine SMIM1 comme etant la proteine porteuse de l’antigene Vel. En depit de ces avancees, la seule methode de phenotypage rapide repose sur l’utilisation de serums polyclonaux humains. Pour pallier ce manque d’outil, un anticorps monoclonal anti-Vel, SpG213Dc IgG humaine, a ete genere a partir de lymphocytes B d’une donneuse immunisee. Cet anticorps a ete evalue en test indirect a l’antiglobuline en technique tube, et en gel filtration Coombs, vis-a-vis d’hematies natives ou traitees a la bromeline. Quelle que soit la technique utilisee, les intensites d’agglutination sont comprises entre 1+ et 3+ avec les hematies natives. Apres traitement enzymatique, une amelioration des intensites d’agglutinations est observee dans tous les cas (≥ 3+). Pour completer cette etude, des tests en cytometrie en flux ont ete realises. Les resultats obtenus ont permis de mettre en evidence un marquage specifique sur des hematies Vel positives, dont l’intensite de fluorescence peut fluctuer en fonction des donneurs. Ces variations phenotypiques pourraient correspondre a des differences d’expression et/ou a des variations genotypiques. Des etudes complementaires doivent etre realisees pour confirmer ces hypotheses. En conclusion, le clone SpG213Dc est le premier anticorps monoclonal d’origine humaine capable de determiner le phenotype Vel. Il est egalement un formidable outil pour l’etude des variations d’expression de l’antigene Vel a la surface des hematies.