心肌肌钙蛋白I（cTnI）合成肽制备、鉴定及抗体研究

目的制备人心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）合成肽并鉴定其质量。方法根据人cTnI氨基酸序列,结合计算机软件分析,预测cTnI分子的亲水性、抗原性和同源性,采用固相多肽合成法合成了cTnI分子98～110位氨基酸肽段序列（13肽,RQLHARVDKVDEE）。经与载体蛋白KLH偶联作为免疫原制备抗cTnI-KLH抗体,用间接ELISA方法鉴定其免疫原性。结果采用多肽合成法合成的cTnI合成多肽（13肽）,经HPLC纯化后,以其制备的cTnI-KLH纯度达到95%。免疫学实验证实,制备的抗体效价达到1∶100 000。结论本研究制备的肽段连接物具有较强的免疫原性,并与生物提取人cTnI具有较好的交叉反应性。cTnI合成肽的研制为临床cTnI检测试剂的国产化奠定了基础。