IBRUTINIBE MODULA A EXPRESSÃO DE MOLÉCULAS DE ADESÃO, DA ECTONUCLEOTIDASE CD39 E REALÇA O POTENCIAL IMUNORREGULATÓRIO DE CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS

Objetivos Dados recentes tem demonstrado que o uso do Ibrutinibe pode ser uma medida terapeutica eficaz contra a doenca do enxerto contra o hospedeiro cronica (DECHc) refrataria a corticoides. As Celulas-tronco mesenquimais (CTMs) constituem uma populacao celular amplamente distribuida no organismo e que tambem podem ser utilizadas para tratamento da DECH aguda e cronica. Considerando que ate o momento os efeitos do Ibrutinibe sobre as propriedades biologicas das CTMs permanecem desconhecidos, este estudo teve como objetivo investigar o impacto desse inibidor de tirosina quinase sobre o potencial imunorregulador das CTMs. Metodos As CTMs envolvidas neste estudo foram isoladas de tecido adiposo humano. Inicialmente, as CTMs foram caracterizadas por Citometria de Fluxo, seguindo a preconizacao da Sociedade Internacional de Terapia Celular. Em seguida, avaliamos se as CTMs expressavam moleculas alvos do Ibrutinibe, como BTK, ITK, JAK3, ERBB2 e EGFR. A partir dessa caracterizacao, avaliamos por Citometria de Fluxo se o Ibrutinibe poderia comprometer a viabilidade das CTMs. Determinamos pela mesma tecnica se o Ibrutinibe poderia impactar no potencial das CTMs em controlar a proliferacao de Linfocitos T ativados. Por fim, de forma a investigar os possiveis mecanismos envolvidos nos desfechos encontrados, avaliamos o efeito do Ibrutinibe sobre a expressao das moleculas de adesao ICAM-1 e VCAM-1, e sobre os niveis proteicos da ectonucleotidase CD39. Resultados As CTMs nao apresentaram alteracao no seu perfil imunofenotipico classico apos tratamento com Ibrutinibe. Importante, as CTMs apresentaram expressao das quinases alvos de Ibrutinibe BTK, ITK, JAK3, ERBB2 e EGFR. O uso de Ibrutinibe em doses elevadas (2μM) causou uma discreta diminuicao na viabilidade das CTMs (p Discussao Estudos recentes tem demonstrado que o Ibrutinibe e capaz de modular a resposta imune, em parte, por balancear a resposta pro-inflamatoria e a geracao de linfocitos T regulatorios. Nossos dados mostram que CTMs tambem sao reguladas para um fenotipo anti-inflamatorio apos tratamento com Ibrutinibe, o que e acompanhado de um aumento de expressao de varias moleculas imunorreguladoras, como ICAM-1, VCAM-1 e CD39. Conclusao Este estudo demonstra pela primeira vez que o Ibrutinibe modula moleculas imunorregulatorias e garante ganho de funcao as CTMs. Estudos adicionais em modelos de DECH sao necessarios para validar esses achados. Em conjunto, esses estudos poderao servir de base para o desenvolvimento de novas abordagens terapeuticas para tratamento de pacientes com DECHc.